Salah satu faktor yang mempengaruhi kinerja karyawan adalah stres kerja. Apabila karyawan mengalami stres, maka kinerja karyawan akan menurun. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dan menganalisis pengaruh stres kerja terhadap kinerja karyawan bagian Pass Gate PT Pelindo Daya Sejahtera Regional Jawa Tengah. Metode pengumpulan data pada penelitian ini menggunakan observasi, kuesioner, wawancara, dan studi pustaka. Populasi dari penelitian ini adalah semua karyawan bagian Pass Gate PT Pelindo Daya Sejahtera Regional Jawa Tengah. Metode pengambilan sampel dalam penelitian ini menggunakan teknik non probability sampling yang menghasilkan 39 responden. Hasil perhitungan regresi linier sederhana sebesar Y = 9,478 ˗ 0,365X. Hasil penelitian menunjukkan variabel stres kerja berpengaruh negatif dan signifikan terhadap kinerja karyawan. Koefisien determinasi (R2 ) sebesar 0,133 yang berarti bahwa kinerja karyawan dipengaruhi oleh stres kerja sebesar 13,3% dan sisanya yaitu sebesar 86,7% dipengaruhi oleh faktor-faktor lain yang tidak diteliti dalam penelitian ini.